Gangsterbossen Lucy Diamond er tilbake i Statene og D.E.B.S., et eliteteam bestående av paramilitære kvinnelige collegestudenter og spioner, er hakk i hæl på henne. Men når deres vakre toppagent Amy Bradshaw forsvinner under mystiske omstendigheter etter å ha møtt den unge og attraktive skurken, satser D.E.B.S. alle sine krefter på å finne Lucys hemmelige tilholdssted, uten tanke på at Amy kanskje aldeles ikke vil bli reddet?